Desinfektionsmidler, der anvendes i et miljø, hvor god fremstillingspraksis (GMP) anvendes, skal valideres for at påvise, at de kan reducere typisk og forventet biobyrde til et acceptabelt niveau.

FDA's (FDA er USA's fødevare- og lægemiddelforvaltning) vejledning til industrien vedrørende aseptisk fremstilling – Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing: Current Good Manufacturing Practice, september 2004, angiver følgende:" "Rutinemæssigt anvendte desinfektionsmidler bør være effektive mod den normale mikrobielle vegetative flora, der findes i produktionsanlægget"¹.

Derudover angiver EudraLex Vol 4. "Reglerne for lægemidler i Den Europæiske Union" Bilag 1, August 2022: "4.34 Desinfektionsprocessen skal valideres. Valideringsundersøgelser skal påvise desinfektionsmidlers egnethed og effektivitet på den specifikke måde, hvorpå de anvendes, og på typen af overflademateriale eller repræsentativt materiale, hvis det er berettiget, og bør understøtte udløbsperioderne for brug af forberedte løsninger.²

I 2018 lancerede Ecolab Life Sciences sit Validex™ effektivitetsprogram for desinfektionsmidler. Validex-datapakken™ indeholder en klar og reproducerbar testmetode til evaluering af desinfektionsmidler til brug i farmaceutiske renrum. Programmet er designet til at sikre en passende metode, samt acceptkriterier for branchen, der kan bruges globalt. Metoden blev derefter brugt til at udvikle et omfattende datasæt ved hjælp af relevante renrumsmikroflora og -overflader.

Validex-tilgangen™ reducerer kompleksiteten og hjælper lægemiddelproducenterne med at opnå større effektivitet ved at give specifik vejledning omkring valideringsprocesser for desinfektionsmidler til renrum.

Validex-metoden™ er baseret på principperne i standardmetoden 'European Norm' (EN) EN 13697. Dette er en kvantitativ ikke-porøs overfladetest3 udviklet af Den Europæiske Standardiseringsorganisation (CEN - Comité Européen de Normalization). CEN's tekniske udvalg 216 udarbejder harmoniserede standarder og testmetoder til vurdering af effektiviteten af desinfektionsmidler og antiseptika.

Disse 'European Norm' (EN)-metoder anvendes og accepteres i vid udstrækning i hele Europa og PIC/S-medlemslande i valideringen af renrumsdesinfektionsmidler, men er ikke specifikt designet til medicinalindustrien.

For at illustrere dette, er EN13697 - testmetoden, der almindeligvis bruges til at validere renrumsdesinfektionsmidler, og som uden tvivl er en af de mest relevante metoder - faktisk beregnet til at demonstrere 'aktivitet af kemiske desinfektionsmidler, der anvendes i fødevareprouktion, industrielt, i husholdninger og institutionelle områder'. Disse typer miljøer vil typisk have meget forskellige niveauer af snavs, biobyrdeniveauer og mikroflora sammenlignet med dem, der typisk opstår i et renrumsmiljø.

På grund af manglen på en specifik testmetode designet til medicinalindustrien blev Validex-metoden™ udviklet med hensyntagen til dette behov ved at anvende parametre, der er egnede til validering af renrumsdesinfektionsmidler og kriterierne i United States Pharmacopeia Chapter 1072 'Desinfektionsmidler og antiseptika' (USP<1072>)⁴. Udviklingen af Validex™ har også taget højde for variation i forskellige regionale standarder, såsom EN-metoderne™ og AOAC/ASTM, som omfatter variation i organismestammer, biocid- og podevolumener og størrelse på testoverflade. Yderligere information om Validex™-programmet kan findes i novemberudgaven 2019 af Cleanroom Technology i artiklen ‘Call for a global disinfectant standard’⁵

Selvom der er et lovkrav om, at slutbrugere skal validere desinfektionsmidler, der anvendes i renrum, er der ingen vejledning om, hvilken specifik metode der skal bruges. Mange slutbrugere vælger at bruge modificerede versioner af EN-standardmetoderne, da de er veldesignede og robuste. De vælger også at bruge acceptkriterier, der afspejler kravene i den farmaceutiske industri, såsom dem, der er angivet i USP <1072>.

Brugen af modificerede standarder for desinfektionsmetoder er en anerkendt tilgang, bredt accepteret af myndighederne. Den samme tilgang blev anvendt i udviklingen af Ecolab Validex-programmet™.

Efter introduktionen af Validex™ og efter 6 års vellykket implementering på tværs af en lang række biovidenskabelige sektorer har Ecolab videreudviklet datapakken til at omfatte vurdering af desinfektionsservietter.

Inkorporeringen af mekanisk handling (aftørring) i testmetoden er vigtig, da desinfektionsmidler, der bruges i renrummet, normalt vil blive påført ved hjælp af en eller anden form for moppe eller aftørring. I 2015 blev en ny metode EN 16615: Quantitative Non-Porous Surface Test with Mechanical Action⁶ for servietter, der anvendes på det medicinske område, introduceret for at demonstrere effektiviteten af desinfektionsmidler og indvirkningen fra mekanisk handling på denne effektivitet.

I august 2022 blev opdateringen til EudraLex Vol.4 Bilag 1 udgivet. Dette instruerede slutbrugerne om at validere desinfektionsmidler 'til den specifikke måde, hvorpå de bruges'. Som følge heraf er denne metode blevet et populært valg til validering af desinfektionsmidler til renrum.

I 2020 blev EN 16615 inkluderet i Det Europæiske Kemikalieagenturs (ECHA) tekniske aftale for biocider v2.2⁷ som den anbefalede metode til effektivitetstest af desinfektionsmidler, der anvendes i praksis ved hjælp af moppe og aftørring. På trods af denne godkendelse forblev EN 16615-standarden primært designet til at vurdere påføring med moppe og gør brug af en tung, standardiseret påføringsvægt (2,4 kg) for at efterligne det tryk, der påføres ved brug af denne teknik. Da vægtpåføring (tryk) ikke er en almindelig faktor, der vurderes i effektivitetsevaluering af biocidservietter, undersøgte videreudviklingen af Validex™ til vurdering af en aftørringsbevægelse også denne faktor. Metodeudviklingsarbejdet viste, at et højere applikationstryk øgede niveauet af observeret mikrobiel reduktion. Af denne grund blev der etableret en lettere, mere passende vægt til at reflektere håndaftørring til Validex™-metoden, som kan bruges til både moppe- og aftørringsapplikation.

Som allerede nævnt, og i overensstemmelse med andre EN-standarder, er EN 16615 ikke designet specifikt til medicinalindustrien. Derfor indarbejder standardmetoden en høj indledende biobyrde (startpodning) og kræver aftørring i to retninger. Selvom EN 16615 kan betragtes som mere repræsentativ for anvendelsen af desinfektionsmiddel i den "virkelige verden", er de bedste påføringsteknikker, der typisk anvendes i renrumsmiljøet, ikke inkorporeret i dens metodologi.

Ecolabs nye valideringsmetode til desinfektionsmiddel til aftørring er specielt designet til renrumsmiljøet. Aftørringsmetoden Validex™ inkorporerer bedste praksis for påføringsteknik til renrummet (ensrettet overlappende aftørring). Andre faktorer, der vurderes inden for metodeudviklingen, og som er designet til bedre at repræsentere renrumsteknikker, omfatter optimal foldning, lag, tryk og mætning af servietter. Ecolab-metoden er også udviklet til at vurdere fjernelse og bevægelse af organismer samt reduktion (logreduktion).

I kombination med vurderingen af mikrobiel effekt er det vigtigt at overveje testmetodernes validitet. En af de almindelige faldgruber, der kan resultere i ineffektiv effektivitetsevaluering, er manglende påvisning af, hvordan visse stadier af en testmetode kan påvirke mikrobiel levedygtighed og detektion. Uden understøttende metodevalidering er det ikke altid muligt at sikre, at den påviste mikrobielle logreduktion alene skyldes biocid effektivitet eller trin i selve testmetoden, der kan påvirke dette resultat.

Som et eksempel vil de fleste testmetoder, herunder EN-standarderne og Validex™, omfatte et trin i organismens podning på en overflade, som man derefter lader tørre inden biocidpåføring. Forståelse af virkningen af dette tørringstrin er afgørende for at sikre, at der er nok levedygtige organismer tilbage på testoverfladen til at demonstrere den ønskede logreduktion, men også for at sikre, at organismerne ikke dræbes ved denne proces alene snarere end effekten af det desinfektionsmiddel, der efterfølgende påføres.

Startpodningsniveauet og tørrebetingelserne er blevet vurderet og udviklet til Validex™ for at sikre, at en gyldig og gentagelig test kan opnås. Yderligere testvaliditet vil omfatte vurdering af en neutralisator, der er i stand til at stoppe biocidvirkningen ud over den validerede kontakttid uden at forårsage nogen toksisk virkning på testorganismen - alle overvejelser gjort inden for udviklingen af Validex™.

Med en kombination af både ikke-mekaniske og mekaniske handlingsundersøgelser (aftørring) leverer Validex-programmet™ et omfattende datasæt ved hjælp af en bred vifte af almindelige renrumsoverflader og mikrobiologisk flora som opsummeret i figur 1.0.